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F03110 human VEGF-R2 ELISA試劑盒 48T/96T1800/2800進口分裝
F03110 human VEGF-R2 ELISA試劑盒 48T/96T 1800/2800 進口分裝F03110 human VEGF-R2 ELISA試劑盒 48T/96T 1800/2800 進口分裝F03110 human VEGF-R2 ELISA試劑盒 48T/96T 1800/2800 進口分裝
| 實時熒光定量Real Time PCR技術服務 | |||
| ◇服務要求： | |||
| 1. 客戶只需提供新鮮的標本，樣本量：組織樣本，質量≥100mg；細胞樣本，細胞數≥1×107。或直接提供純化 | |||
| 好的DNA（大于5ug/樣品） 。 | |||
| 2. 請通過 提供已知的全長基因序列。 | |||
| 3. 請提供盡可能詳細的背景資料： DNA/ RNA 來源、豐度等。 | |||
| ◇樣本制備及注意事項: | |||
| 1. 組織培養細胞：沉淀細胞，用PBS 洗一次，再用少量的PBS 懸浮細胞，然后加5~10 倍體積的RNAlater 。4℃過 | |||
| 夜后，-20℃*保存。 | |||
| 2. 組織：采集新鮮組織（注意：生物體死亡后1分鐘內取材料并保存好），快速簡單切碎組織樣品，任何一邊的 | |||
| zui大厚度不能大于0.5cm，然后將組織碎塊放入到5 倍體積的RNAlater中 (我公司有售：100ml，260元）。4℃過夜 | |||
| 后，-20℃*保存。用RNAlater保存的樣品非常穩定，建議4℃運輸，也可常溫運輸。 | |||
| ◇細胞培養上清： | ||||||||||||||||||||||||
| 檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的 | ||||||||||||||||||||||||
| 成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放 | ||||||||||||||||||||||||
| 出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。 | ||||||||||||||||||||||||
| ◇組織標本： | ||||||||||||||||||||||||
| 切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin（ | ||||||||||||||||||||||||
| *）。用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清置于-20度或- | ||||||||||||||||||||||||
| 70度保存，如有必要，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。 | ||||||||||||||||||||||||
| （四） | ||||||||||||||||||||||||
| 免疫印跡（western blot）技術服務 | ||||||||||||||||||||||||
| ◇樣本制備 | ||||||||||||||||||||||||
| 1. 懸浮細胞：取大約 1×107個細胞，低速離心收集，棄去培養液，加入1ml PBS懸浮細胞，轉入小離心管中，低 | ||||||||||||||||||||||||
| 速離心沉淀細胞，棄去PBS，放入-70℃ 冰箱保存。 | ||||||||||||||||||||||||
| 2. 貼壁細胞：取大約1×107個貼壁細胞，*消化后加入PBS懸浮細胞，轉入小離心管中，低速離心沉淀細胞， | ||||||||||||||||||||||||
| 棄去PBS，放入-70℃ 冰箱保存。 | ||||||||||||||||||||||||
| 3. 組織：采集新鮮組織（注意：生物體死亡后10分鐘內取材料并保存好），組織塊以PBS或生理鹽水清洗干凈， | ||||||||||||||||||||||||
| 切成小塊，放入-70℃冰箱中保存。 | ||||||||||||||||||||||||
| 樣本量：組織樣本，質量大于100mg；細胞樣本，細胞數大于1×106； | ||||||||||||||||||||||||
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