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BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受態細胞

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BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受態細胞南京賽泓瑞生物在感受態細胞的研發方面,實力雄厚,擁有了克隆、表達、酵母和農桿菌4大類,共計百余種感受態細胞。在電擊感受態方面,擁有了大腸桿菌 電轉化感受態細胞和農桿菌電擊感受態種類,*提高了客戶在轉基因以及文庫構建方面的成功率。

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BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受態細胞基因型:

FompT hsdS(rB mB) dcm+ Tetr galλ(DE3) endA Hte [argU proL Camr] [argU ileY leuW Strep/Specr]

BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受態細胞簡要說明:

 BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL菌株來源于Stratagene公司的BL21-Gold 菌株,缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶,從而減少對重組蛋白的降解,補充大腸桿菌缺乏的4種稀有密碼子( AGA、AUA、CCC、CUA) 對應的tRNA (argU、ileY、proL、leuW),提高外源基因,尤其是富含AT-或 GC-的真核基因在原核系統中的表達水平。
該菌株染色體整合了λ噬菌體DE3區(DE3區含有T7噬菌體RNA聚合酶),可同時表達T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等質粒的蛋白表達,同時具有四環素,*,*,*抗性。
 BL21- Codon Plus(DE3)-RIPL 感受態細胞由特殊工藝制作,經pUC19質粒檢測轉化效率高達108cfu/μg。

BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受態細胞操作說明:

  1.  取100μl冰上融化的 BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL感受態細胞,加入目的質粒并輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。

  1.  向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養基(2YT或LB),混勻后37℃,200rpm復蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。

  1.  將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。

 

BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受態細胞注意事項:

  1.   感受態細胞在冰上融化。
  2.  混入質粒時應輕柔操作。
  3.  轉化高濃度的質粒可相應減少終用于涂板的菌量。
  4.  誘導時,IPTG濃度可選(0.1-2mM均可)。

5. 為獲得需要量的蛋白,誘導時間,溫度,IPTG濃度需實驗者優化。

BL21(DE3)pLysS感受態細胞其他*:


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