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凡購買本司任何一種酶聯免疫檢測試劑盒，您只需將需要檢測的動物（Human,Rat,Mouse,Rabbit,Pig,Monkey……）種類和檢測指標（介素類、因子類）及標本數量（48T/96T）告知我司業務人（張）員即可。在接到客戶標本當日起，兩周內將檢測報告交到客戶手中。

北京冬歌生物科技有限公司提供的檢測用所有試劑，適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本，靈敏度*，多年專業酶免服務，我們保證對所售任何產品一概負責到底，每一份實驗結果都真實可靠。

在收集標本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。我們提倡新鮮標本盡早檢測，對收集后當天就進行檢測的標本，及時儲存在4℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本，請造模取材后，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差，蛋白極易降解，直接影響實驗質量，所以避免反復凍融。代測放免標本的客戶取材前須向我司銷售人員索要說明書，具體操作注意事項請與我司技術人員溝通。

包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

1、血清：

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

2、血漿：

應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

3、尿液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

4、細胞培養上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

5、組織標本：

切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

1、 包被抗原：稀釋液pH 9.6 碳酸鹽緩沖液，多肽濃度2ug/ml，0.1ml/孔，4oC，洗凈

2、 1%BSA (pH 9.6 碳酸鹽緩沖液) 封閉，0.1ml/孔，37oC1h，洗凈

3、 稀釋抗血清(可稀釋不同濃度) 0.1ml/孔，37oC 30分鐘，洗凈

4、 稀釋辣根過氧化物每標記的二抗 0.1ml/孔，37oC 40分鐘，洗凈

5、 顯色：TMB顯色

A液：四甲基聯苯胺10mg 溶于DMF1ml中，再用pH5.0檸檬酸緩沖液稀釋100倍

B液：5ul雙氧水加蒸餾水12.5ml

終止液：2N硫酸

A液、B液各一滴，比光顯色10分鐘，終止液一滴

6、 450nm 波長 測OD值