【儀器網(wǎng) 行業(yè)應(yīng)用】液相色譜法作為一種以液體為流動相,并采用顆粒極細(xì)的固定相的柱色譜分離技術(shù),其分離機(jī)理一般是根據(jù)混合物中各組分對兩相親和力的差別,從而實(shí)現(xiàn)物質(zhì)的分析研究。目前,液相色譜法在食品分析、生物液體、環(huán)境分析等各類物質(zhì)分析領(lǐng)域都有著廣泛的使用。為深入了解液相色譜的原理,以下根據(jù)網(wǎng)上資料,對液相色譜的各系統(tǒng)進(jìn)行簡述:
1.進(jìn)樣系統(tǒng):一般液相色譜的進(jìn)樣系統(tǒng)分為手動進(jìn)樣閥和自動進(jìn)樣器。
2.輸液系統(tǒng):*按輸出液恒定的因素分恒壓泵和恒流泵。其中,*的流量穩(wěn)定性的保留值是色譜定性的重要依據(jù)。此外,*按工作方式分為氣動泵和機(jī)械泵兩大類。機(jī)械泵中又有螺旋傳動*、單活塞往復(fù)泵、雙活塞往復(fù)泵和往復(fù)式隔膜泵。
3.分離系統(tǒng):一般液相色譜中分離系統(tǒng)包括色譜柱、保護(hù)柱以及柱溫箱。其中,色譜柱是樣品分離的核心,色譜柱使用的pH值范圍、溶劑耐受范圍、壓力范圍和維護(hù)方法等事項(xiàng)是操作液相色譜時(shí)的重要事項(xiàng)。而保護(hù)柱的作用主要是防止吸附性強(qiáng)的雜質(zhì)對色譜柱污染,從而延長色譜柱的壽命。另外,還有為避免色譜柱溫度變化,導(dǎo)致保留時(shí)間出現(xiàn)變化的柱溫。
4.檢測系統(tǒng):常見液相色譜常用的檢測器有紫外檢測器、示差折光檢測器和熒光檢測器三種。其中,紫外檢測器適用于對紫外光或可見光有吸收性能樣品的檢測,不僅能對如蛋白質(zhì)、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等物質(zhì)分析進(jìn)行使用,而且還具有靈敏度高、線性范圍寬、對溫度和流速變化不敏感等優(yōu)點(diǎn)。而示差折光檢測器,則是專門分析檢測具有與流動相折光率不同的樣品組分。目前,示差折光檢測器具有通用性強(qiáng)、操作簡單等優(yōu)點(diǎn)。較多應(yīng)用于糖類化合物的檢測。還有熒光檢測器,則是對具有熒光的物質(zhì)進(jìn)行檢測分析的檢測器,其檢測靈敏度高,而且還能進(jìn)行痕量分析以及梯度洗脫樣品的檢測。
5.數(shù)據(jù)處理系統(tǒng):在液相色譜檢測分析后,需要對測試數(shù)據(jù)進(jìn)行采集、貯存、顯示、打印和處理等操作,而數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)便是能助力分離、制備或鑒定樣品的工作等的系統(tǒng)。
由于資料有限,因而上述分析并不全面,若要深入了解液相色譜,建議咨詢相關(guān)專業(yè)技術(shù)人員。
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