【儀器網 解決方案】暗視野顯微鏡也叫超顯微鏡,常用來觀察未染色的透明樣品。
暗視野顯微鏡問題及解決方法
1、問題:
有足夠的照明,使標本可見,或標本是可見的,但很微弱。
解決方案:燈電壓可以被設置得太低,或燈泡可能沒有足夠的強度照射試樣。將電壓升高到大約12伏(12伏,100瓦鎢鹵素燈泡)或更換光源,如果可能的話,與更大的強度。如果不解決這個問題,檢查臺下冷凝器,以確保它正確的位置用適當大小的視場光闌。此外,還要檢查顏色和/或中性密度濾光片,偏光板,相位差板,或任何其他組件,可能會降低光照強度的光路, 如果這個問題發生的高數值孔徑反射式冷凝器,檢查做出一定冷凝器ding級鏡頭正確涂油的顯微鏡載片上的底部。如果浸沒接觸已被打破,重新申請了冷凝器的油和機架,直到頂端透鏡*浸在油中和底部的滑動接觸。
2、問題:
視場的中心降低光照強度,有一個暗點,但在外圍的對象都亮起,顯示正常。
解決方案:臺下聚光器位置不正確或光站的目標是錯誤的大小。小心機架冷凝器向上和向下,同時在視場中觀察試樣。檢查做出一定的冷凝器孔徑和視場光闌設置敞開位置。如果這并不影響照明,改變視場光闌尺寸使其稍大或稍小,然后重新檢查照明。 偶爾出現此問題時使用過厚(大于標準一毫米)顯微鏡載玻片。使用千分尺或一組表卡尺來確定厚度滑動和滑動/蓋玻片組合。如果滑動太厚,要么改變到正確的厚度的滑動或檢查冷凝器,以確定它是否可以調整,以補償不同厚度的幻燈片。
3、問題:
燈往往有一個很短的壽命,燈泡內部有涂層的黑色蒸發的鎢燒結。
解決方案:長時間在過高的電壓,這肯定會影響其壽命的燈泡已使用。更換燈泡減少燈電壓經過觀察和/或試樣的顯微攝影。
4、問題:
圖像有明場暗區的中心的帶或不帶外周。
解決方案:這個問題是典型的臺下冷凝器時,被錯誤地集中或場站太小。恢復明場,并重新建立科勒照明的條件下,再重復暗場的過程中,確保冷凝器集中。如果這沒有幫助,增加視場光闌的大小,直到建立適當的暗場條件, 當使用目標具有太高的數值孔徑為暗場聚光,也可能出現這個問題。如果是在目標內部的可變光闌,降低光圈開度的大小,以確定是否太多的斜光進入物鏡鏡頭前面。此外,它可能有助于增加視場光闌的大小或改變反射的暗場聚光更高的數值孔徑。
5、問題:
視場的外圍,只有一側是光明的。
解決方案:檢查物鏡轉換器,以確保正確地定位在顯微鏡的光軸的目標。有一個制動停止,正確定位目標時,應該產生積極的“咔嚓”。問題也可能發生,如果不能正確居中視場光闌。卸下目鏡和相望遠鏡放置在眼管(或使用貝特朗鏡頭),然后使用定心螺絲正確對齊視場光闌。
6、問題:
試樣圖像不清晰,缺乏足夠的對比度和細節。
解決方案:暗視野顯微鏡標本可能不適合。許多染色標本沒有足夠的散射光,暗場條件下能清楚成像。用試樣的厚度也可能是一個問題,因為非常薄的樣品往往不成像以及與斜光線從暗視野冷凝器發射。這提高了標本的對比,以確定是否變更明場,相襯,DIC,霍夫曼調制對比度。
7、問題:
明亮區域是重點妨礙觀看和/或暗場標本的顯微攝影。
解決方案:這可能是由于灰塵,頭發,纖維,和/或污物污染的光學表面冷凝器上方的某處。*清潔試樣滑動,光學級紙巾或棉球。有時候,這個問題的產生是由于在物鏡前透鏡的污染。小心松開其所在地物鏡轉換器的目標,慢慢轉動,同時通過目鏡觀察樣品。,如果梗阻一起旋轉的目標,那么它可能是由于前透鏡上的灰塵。取出的目標和滋潤鏡頭前輕輕呼氣,然后再用鏡頭紙或棉簽包裹的長木桿。更換的目標和檢查,以一定的梗阻已被*刪除。
8、問題:
背景是均勻的照明,但不是*黑暗或會出現灰色的顏色。
解決方案:這個問題通常發生在不透明場站太小,客觀。卸下目鏡和查看一個光路中的樣本的情況下的目標使用一個相位望遠鏡或伯特蘭透鏡的后焦面上。整個背部焦平面應該是黑暗,沒有任何出現的四周邊緣,明亮的光線。如果在物鏡的后焦面的光的弧或圓的觀察,更改一個稍微大的視場光闌。此外,降低視場光闌的大小,將有助于抑制眩光和生產一個漆黑的背景(要小心,不要關閉此虹膜光圈太多)。
9、問題:
燈泡冷凝器的圖像的視場部分地填充,模糊試樣的詳細信息。
解決方案:滑動可能太薄或冷凝器可能被調得太高。厚度測量顯微鏡幻燈片,并進行檢查,以確定油接觸不破。如果遇到困難,保持幻燈片油的底部,嘗試使用較厚的幻燈片。
10、問題:
顏色顯示在背景中,或使背景光線不均與灰鑄鐵。
解決方案:這個問題往往出現很厚,或當太多的光散射污染工件的安裝介質中捕獲整個坐騎。關閉視場光闌試樣滑動和旋轉,以找到好的方向,然后確定問題是否已得到糾正。試樣被重新安裝在一個較薄的安裝或安裝介質,可能需要進行過濾。小心地用柔軟的鏡頭紙或棉簽清潔整個顯微鏡載玻片和蓋玻片。
11、問題:
當于水性坐騎,觀賞水生生物標本漂在一個單一的方向不斷,難以觀察和顯微攝影。
解決方案:對流,正在建立在蓋玻片的邊緣,由于緩慢蒸發。將胎圈凡士林或Cytoseal的蓋玻片周圍介質的外周安裝到顯微鏡載片上,牢固地密封。商業產品可用,可以加入到水中,緩慢的移動這些分鐘生物體,使它們更容易拍攝。
12、問題:
當觀看試樣通過10x物鏡的視場的中心,有一個長圓形的光點。
解決方案:該燈冷凝器可能會錯誤地聚焦或擴散過濾器可能會丟失,導致圖像出現在視場中的燈絲。重新聚焦聚光,并在光路中有一個擴散濾波。
13、問題:
視場有亮點,實現清晰對焦的標本有問題。
解決方案:可能被困在小氣泡與冷凝器之間的頂部和底部的顯微鏡載片上的油。卸下目鏡(或插入一個勃氏鏡)觀察的目標的后焦平面上,將是可見的氣泡。為了彌補,斷油接觸,并用棉簽除去殘留的氣泡。清理多余的油,然后從冷凝器的前鏡頭和顯微鏡幻燈片應用干凈鏡頭滴油。如果問題仍然存在,*清潔所有的光學表面,前重新申請機油。
14、問題:
在高放大倍率,膠體粒子顯示不全的牛頓 環出現照明不均。
解決方案:冷凝器可能是偏離中心。切換到低功耗的目標和中心冷凝器。請仔細檢查,以確定是否在更高的功率目標具有不同的中心,如果是的話,中心的目標,以顯微鏡光軸。
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