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【儀器網(wǎng) 維修保養(yǎng)】色譜技術(shù)是一種分離分析手段，液相色譜儀的分離是在色譜分離柱中實(shí)現(xiàn)的，因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱就是色譜系統(tǒng)的心臟。色譜柱通常由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成，如何保護(hù)好分離柱及減少柱的污染是延長(zhǎng)色譜柱壽命的關(guān)鍵。
一、色譜柱的維護(hù)
1、加保護(hù)柱(預(yù)柱)。保護(hù)柱是根內(nèi)裝填料與分離柱性質(zhì)相近的短柱，接在分離柱前或代替流路過(guò)濾器。保護(hù)柱的作用是收集和阻塞分離柱口的化學(xué)垃圾，如果這些垃圾直接進(jìn)入分離柱會(huì)逐漸堆積在柱頭，就會(huì)降低柱效能。
2、保護(hù)柱是消耗品，一般在分析50個(gè)樣品后需更換新柱芯。
3、避免高壓沖擊分離柱。一般色譜柱都能承受得起高壓，但經(jīng)不住突然變化的高壓沖擊，會(huì)改變柱床體積，進(jìn)而影響柱效。引起高壓沖擊的原因主要有：進(jìn)樣器樣品閥轉(zhuǎn)動(dòng)緩慢、泵啟動(dòng)太快與柱切換等操作。
二、合理選擇分離柱
選擇色譜分離柱主要根據(jù)有兩點(diǎn)，一是根據(jù)待測(cè)組分的分子量大小；二是根據(jù)流動(dòng)相條件，包括PH值、離子強(qiáng)度和溶劑極性等。
1、傳統(tǒng)硅膠基質(zhì)的鍵合相柱要求流動(dòng)相PH值在3-7之間，PH值(>8) 的流動(dòng)相能溶解硅膠使鍵合相流失。所以一定要根據(jù)分析的對(duì)象、流動(dòng)相的條件選擇合適的分離柱。
2、定期沖洗分離柱。每次分析工作結(jié)束時(shí)，沖洗完緩沖鹽后要過(guò)度到用強(qiáng)溶劑沖洗柱子，如色譜純甲醇等可以沖去吸附在柱上的強(qiáng)保留組分。
三、減少柱的污染
1、純化樣品。樣品純化的越干凈，分離柱的壽命就越長(zhǎng)；反之只有提取沒有純化的樣品，分離柱柱效下降較快。
2、建立一套有效的色譜分析和樣品前處理方法、特別是在分析血漿和尿液樣品時(shí)，要特別注意樣品的提取與純化，盡量使處理過(guò)的樣品中雜質(zhì)(如大分子蛋白、有機(jī)物等)降到低，以保護(hù)柱頭和柱子。
3、提取純化好的樣品應(yīng)用流動(dòng)相來(lái)溶解，一方面可以減少色譜圖中的溶劑峰干擾，另一方面也能夠檢查樣品在流動(dòng)相中的溶解性，如果樣品進(jìn)樣后在流動(dòng)相中沉淀就會(huì)堵塞進(jìn)樣器和柱頭，甚至樣品分解出現(xiàn)怪峰。如果出現(xiàn)樣品與流動(dòng)相不溶要設(shè)法改變?nèi)芙鈼l件，如更換樣品溶劑、改進(jìn)樣品處理方法、過(guò)濾或者去除不溶性物質(zhì)。
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