紅細胞裂解液配制方法由上海古朵生物提供，產品名稱：紅細胞裂解液，供應商：古朵生化試劑廠家，
規格：100ml/500ml，分類：細胞組分分離，儲存條件：4℃,12個月，用途：去除細胞懸液中的紅細胞,屬于溶解紅細胞方法的一種
紅細胞裂解液配制方法，操作步驟，使用方法及其他咨訊由上海古朵生物提供講述，本司現貨供應ELISA試劑盒，動物血清，標準品，對照品，培養基，抗體，抗原，染色液，溶液，緩沖液，裂解液，生化試劑，化學試劑，生物分子，微生物，實驗耗材，其他試劑等，品種齊全，價格實惠，歡迎訂購!
產品名稱：紅細胞裂解液
供應商：古朵生化試劑廠家
規格：100ml/500ml
分類：細胞組分分離
儲存條件：4℃,12個月
用途：去除細胞懸液中的紅細胞,屬于溶解紅細胞方法的一種
注意事項：無菌溶液。注意無菌操作,經過濾除菌處理。
紅細胞裂解液是一種用于從人或鼠等的血液或組織樣品中裂解并去除無細胞核紅細胞的溶液。在裂解紅細胞的同時幾乎不損傷淋巴細胞或其它有細胞核的細胞。本裂解液不適用于有細胞核紅細胞的裂解，例如鳥或禽類的紅細胞。
本裂解液經過無菌處理，處理過的血液或組織細胞樣品可以用于后續的原代培養、細胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規的分析和檢測。
1、新鮮組織經過膠原酶或*等消化處理，通過適當方法分散成細胞懸液，離心棄上清。
2、對于0.2mL細胞沉淀加入1mL紅細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解4~5min。
3、加入15~20mL PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液，混勻。
4、1000g離心5min，棄紅色上清。
5、如果發現紅細胞裂解不*，可以重復上述步驟2和步驟3一次。通常極微量的紅細胞不會影響后續的一些檢測。
6、根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀后即可進行計數等后續實驗。
說明：對于常規步驟，多一步洗滌過程中的離心，但可以節省洗滌液的用量，并且洗滌效果也更好一些，同時不需要大體積的離心管。快速步驟少了一次離心，但洗滌效果略差一些，同時需要大體積的離心管。
1、試劑配制
原液1號：10 g葡萄糖+0.6 g磷酸二氫鉀+3.58 g*(7H2O)+20 ml 5 g/L酚紅溶液，加雙蒸水定容至1 000 ml。
原液2號：1.86 g氯化鈣(2H2O)+4.0 g氯化鉀+80 g氯化鈉+1.04 g氯化鎂+2.0 g*(7H2O)，加雙蒸水定容至1 000 ml。
應用液有3種，1#：10 ml原液1號+10 ml原液2號，加雙蒸水定容至100 ml。
2#：20 ml原液1號+20 ml原液2號，加雙蒸水定容至100 ml。
3#：1 ml原液1號+1 ml原液2號，加雙蒸水定容至100 ml。
2、紅細胞裂解
取100 μl抗凝全血，加2 ml應用液3#，混勻15～20 s;加2 ml應用液2#，混勻15～20 s;加4 ml應用液1#，混勻15～20 s;300×g離心2 min，棄上清;收集沉淀，加PBS緩沖液，制成白細胞懸液，備用。
(這種紅細胞裂解法滿足了白細胞流式細胞儀檢測分選要求，價格低廉，是一種簡便快捷、經濟實用的白細胞純化分選方法。
3、紅細胞裂解液(0.01mol/L Tris-HCL pH7.6; 0.01mol/L NaCl; 0.005mol/L MgCl2)
4、紅細胞裂解液(139.6 mmol/L NH4Cl, 16.96 mmol/L Tris, 用1 mol/L HCl調 pH至7.2)
5、紅細胞裂解液的制備：碳酸氫鉀(KHCO3)1.0g;氯化氨(NH4CL)8.3g;EDTA-Na2 0.037g，加雙蒸水至1000ml，即工作液。
一、組織細胞樣品：
1、新鮮組織經*或膠原酶等消化分散成單個細胞懸液，離心棄去上清液;
2、從4℃冰箱中取出ELS裂解液，按1:3-5的比例向細胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml細胞壓積加入3-5ml裂解液)，輕輕吹打混勻;
3、800-1000rpm離心5-8分鐘，離心棄去上層紅色清液;
4、收集沉淀部分，加入Hank’s液或無血清培養液離心洗2-3次;
5、如裂解不*可重復步驟2和3;
6、重懸細胞，用于后續實驗;如提取RNA，是于步驟4開始使用DEPC水配制的溶液中進行。
二、血細胞：
1、新鮮抗凝血，離心棄去上清液;
2、取出4℃冰箱預冷的ELS裂解液，按1:6-10的比例向細胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml細胞壓積加入6-10ml裂解液)，輕輕吹打混勻;
3、800-1000rpm離心5-8分鐘，離心棄去上層紅色清液;
4、收集沉淀部分，加入Hank’s液或無血清培養液離心洗2-3次;
5、如裂解不*可重復步驟2和3;
6、重懸細胞，用于后續實驗;如提取RNA，是于步驟4開始使用DEPC水配制的溶液進行。
標簽：紅細胞裂解液使用方法 紅細胞裂解液配制方法 紅細胞裂解液操作步驟 紅細胞裂解液
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